正当中国各界激烈争论转基因水稻安全问题之际，在菲律宾首都马尼

正当中国各界激烈争论转基因水稻安全问题之际，在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β—胡萝卜素．它呈现金黄色泽，故称“金色大米”。(摘自20l0年4月<新世纪>周刊) “金色大米”的培育流程如图所示．请回答下列问题。(已知酶I的识别序列和切点是 —G ^↓ GATCC—，酶II的识别序列和切点是—^↓ GATC—)。

(1)图中a、b所示获得目的基因的方法是                ，培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是                    。图中c称作           ，它的构成除了复制原点、目的基因外，还必须有          、           、            等。

(2)据图分析，在构建c的过程中，目的基因用         (限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ)进行了切割。检验重组载体导入能否成功需要利用          作为标记基因。

(3)过程e运用了细胞工程中的            技术，该技术的理论依据是                ；

在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行

        和         。

（4）若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过

        工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计.该工程是一项难度很大的工程，目前成功的例子不多，主要原因是                                     .

(1)反转录法（逆转录合成）   基因表达载体的构建   基因表达载体(或重组质粒，重组DNA分子)     启动子   终止子   标记基因    

(2) 限制酶Ⅱ     基因I

（3）植物组织培养；  细胞全能性   脱分化  再分化

（4）蛋白质  

因为蛋白质的高级结构十分复杂，目前对很多蛋白质的高级结构还不了解。