）【生物——现代生物科技专题】 2008年诺贝尔化学奖授予了3位在研

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2008年诺贝尔化学奖授予了3位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外线的激发下发出荧光，借助GFP发出的荧光可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。2006年12月26日，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农大降生，具体培育过程如图所示，请据图回答下列问题：

（1）上述过程涉及到的现代生物技术，属于分子水平的是______________。

（2）绿色荧光蛋白基因我们称之为目的基因，在将其导入受体细胞前需将其与载体结合以构建______________，在其过程中需要用到的工具酶有_________________________。B过程最有效地方法是________________。

（3）若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用________________处理猪胚胎的部分组织。

（4）E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________________________方法处理成年母猪。

（5）经过培养得到早期胚胎后可以用__________________技术以获得更多的转基因克隆猪，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行____________________处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境。

（1）基因工程（2）基因表达载体    限制性核酸内切酶和DNA连接酶     显微注射技术（3）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） （4）注射促性腺激素（5）胚胎分割     同期发情

考查了基因工程，细胞工程和胚胎工程。在基因工程、细胞工程和胚胎工程中，属于分子水平是DNA分子重组技术，即转基因技术；基因工程的核心步骤就是基因表达载体的构建；在基因工程中常用的工具酶是限制酶和DNA的连接酶；动物基因工程中将外源基因导入受体细胞常用的方法是显微注射技术；动物细胞培养时，要用胰蛋白酶处理，使其形成单个细胞；获得大量的卵母细胞需用注射促性腺激素方法处理成年母猪；要获得更多的转基因克隆猪，需要用胚胎分割技术，胚胎移植成功的关键是供受体母体处于相同的生理环境，所以需要同期发情处理。