(05天津卷)(18分)(1)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是―G↓

05天津卷)18分)

1)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是―GGATCC―,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是―GATC―。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

 

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

 

③在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?

答案

答案:

可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互补的)

解析:限制性内切酶能识别DNA分子上特定的序列和切点并进行切割,限制性内切酶具有专一性,即一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列。被限制内切酶切开的DNA两条单链切口,各含有几个伸出的、可互补配对的核苷酸,这种切口就是黏性末端。黏性末端之间,只要切口处伸出的核苷酸间存在互补,就能在DNA连接酶的作用下连接起来。虽然限制性内切酶I和限制性内切酶II识别的序列和切点是不同的,但是形成的黏性末端是相同的,存在着互补关系,因此在DNA连接酶的作用下是可以连接起来的。

 

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