5．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚

5．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入__________作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基__________(A.影响；B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量，常采用__________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于____________________；使用__________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？

________________________________________________________________________。

(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？

(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？

答案：(1)苯酚　A　平板菌落计数(活菌计数或菌落计数)

(2)④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源　平板分离(稀释涂布平板或平板画线分离)　避免培养过程中产生的水分影响微生物的生长

(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量。

(4)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作。

解析：题目中所筛选的细菌“只能”降解苯酚，故可采用以苯酚为唯一碳源的选择培养基筛选，用含除苯酚外其他碳源的培养基作为对照。培养液中苯酚浓度下降的速度可反映该菌对苯酚的降解能力，严格灭菌、无菌操作可有效防止实验过程中的杂菌污染。