下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

 

据图回答:

(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用________________________________________________________________________

限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。

(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。

A.启动子       B.tetR

C.复制原点    D.ampR

(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。

A.农杆菌转化      B.大肠杆菌转化

C.显微注射    D.细胞融合

(4)过程②采用的生物技术是________。

(5)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。

(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________(填字母代号)技术。

A.核酸分子杂交    B.基因序列分析

C.抗原—抗体杂交     D.PCR

 

答案

(1)HindⅢ和BamHⅠ 氨苄青霉素

(2)A

(3)C

(4)胚胎移植技术

(5)全能

(6)C

 

载体上不含SmaⅠ限制酶的酶切位点,若用SmaⅠ酶切目的基因,则无法与载体连接。因为四环素抗性基因在酶切后被破坏,所以只能用氨苄青霉素进行筛选。启动子可启动基因的转录过程。动物细胞常用显微注射法导入重组载体。要检测基因是否成功表达,需检测人乳铁蛋白是否合成,所以需采用抗原—抗体杂交技术。

 

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