为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
| 已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对） | 第一步水解 | 产物（单位bp） | 第二步水解 | 产物（单位bp） |
| A酶切割 | 2100 | 将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割 | 1900 200 | |
| 1400 | 800 600 | |||
| 1000 | 1000 | |||
| 500 | 500 | |||
| B酶切割 | 2500 | 将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割 | 1900 600 | |
| 1300 | 800 500 | |||
| 1200 | 1000 200 | |||
| 经A酶和B酶同时切割 | 1900 1000 800 600 500 200 | |||
（1）该实验中体现出限制酶的作用特点是 。
（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为
个和 个。
（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。（3分）
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（4）已知BamHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后 
和 
序列明显增多。该过程中DNA连接酶催化 键的形成。
（5）一个基因表达载体的组成除了目的基因外，还必须有 、 以及标记基因。
