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降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如图。在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:

1Klenow酶是一种__________酶,合成的双链DNA__________个碱基对。

2)获得的双链DNAEcoR__I(识别序列和切割位点-GAATTC-)和BamH_I(识别序列和切割位点-GGATTC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

①大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它__________

②设计EcoR_IBamH_I进行双酶切割的目的是__________

③要进行重组质粒的鉴定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有__________

3)经DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是__________

答案

1DNA聚合酶     126

2)①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(答案合理也给分)

②保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)

③标记基因

3)合成的核苷酸单链仍较长,产生缺失碱基的现象。

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