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科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发许多动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下相关问题:

(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体,促进动物细胞融合常用的诱导因素是________________________________________。

(2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选,第1次筛选的目的是________________________________,第2次筛选的目的是_____________________________________。

(3)有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。请回答:    

①酶A是指__________________________________________,

酶B是指__________。

②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是___________________;

题目中Ⅱ所指的细胞是,Ⅲ所指的细胞具有的特点是______________。

(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,试用相关的图示及文字表示该过程:

 

答案

(1)灭活的病毒

(2)筛选出杂交瘤细胞

筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞

(3)①限制性核酸内切酶DNA连接酶

②检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达(或检测受体细胞是否显示出目的基因控制的性状)浆细胞既能无限增殖又能产生特定抗体

(4)见图

 

(1)诱导动物细胞融合的方法有三种,其中用灭活的病毒是常用方法。(2)在单克隆抗体制备过程中,融合的细胞共有3种形态,第1次筛选的目的是选出杂交瘤细胞,但是杂交瘤细胞不一定产生所需抗体,所以还必须进行第2次筛选。(3)基因工程中用到的酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶,将重组质粒成功导入后,进行检测的目的是看目的基因是否表达。题目中Ⅱ所指的细胞是浆细胞,因为只有浆细胞才会产生抗体,Ⅲ所指的细胞是导入目的基因的浆细胞,由于目的基因控制细胞无限增殖,所以可用转基因技术来生产单克隆抗体。(4)由题干可知,从无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),所以采用核移植技术,应将无限增殖细胞的核除去,留下细胞质,让其与浆细胞核融合,则可产生单克隆抗体。

 

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