白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到

白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中,使其分泌出有活性人白细胞介素。

  

(1)在体液免疫过程中,白细胞介素是由___细胞分泌的,可作用于受到抗原刺激的B细胞,使B细胞增殖,分化、形成____________细胞。

   (2)目的基因获取:从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞,于37°C培养48h,提取细胞总RNA,生成eDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列,合成引物、通过PCR扩增获取目的基因,此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是______________________________ 。

   (3)重组载体的构建:用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后,用_______________酶处理,形成重组载体。该载体与细胞膜上载体的化学本质分别是______和______。

   (4)将重组载体导入酵母细胞,在培养液中培养一段时间后,收集菌液离心取______(上清液/菌体)进行产物鉴定。若要统计培养液中酵母菌的活菌数目,常用的方法是_________。

   (5)利用纯化的产物进行细胞培养实验,可研究人白细胞介素对于____________ 的作用。

答案

(每空2分,共18分)

   (1)T;浆细胞和记忆;

   (2)模板eDNA、耐高温(热稳定)DNA聚合酶(Taq酶)、引物;

   (3)DNA连接;DNA;蛋白质;

   (4)上清液;稀释涂布平板法;

   (5)促进淋巴细胞增殖(抑制肿瘤细胞增殖)。


解析:

(1)为识记内容。考查产生淋巴因子的细胞名称及B细胞分化形成的细胞名称。

(2)考查PCR技术扩增目的基因所需条件。

(3)注意细胞膜上的载体和基因工程中的载体是不同的概念,本质也不同。

(4)离心后,菌体为沉淀。所以进行代谢产物的鉴定需要的是取上清液;微生物的计数方法有活菌计数法(稀释涂布平板法)和显微镜直接计数两种。

(5)考查白细胞介素的作用。即淋巴因子的作用,就是促进淋巴细胞的增殖。

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