在遗传工程技术中,限制性内切酶主要用于( ) A.目的基因的提

在遗传工程技术中,限制性内切酶主要用于(  )

A.目的基因的提取和导入

B.目的基因的导入和检测

C.目的基因与运载体的结合和导入

D.目的基因的提取和与运载体结合

 

答案

D

基因的“剪刀”——限制性内切酶的作用特点是:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。酶切的结果是产生黏性末端。在目的基因与运载体结合时,若以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个切口,露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端。将切下的目的基因的片段插入到质粒的切口处,再加入适量的DNA连接酶,把两个断口处的磷酸二酯键连接起来,这样就形成了一个重组DNA分子。可见,在提取目的基因和目的基因与运载体结合时,均需要限制性内切酶。而将目的基因导入受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径,或者是显微注射。

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