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番茄果实成熟过程中,某种酶(PG)开始合成并显著增加,促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术(见图解),可有效解决此问题。该技术的核心是,从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA,继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞,经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中,反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA(mRNA)互补形或双链RNA,阻止靶mRNA进一步翻译形成PG,从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答:

(1)若要将人工合成的完整反义基因克隆出成百上千的反义基因,可用        (写出中文名称)技术实现体外快速扩增。

(2)假设PCR反应中的初始只有一个DNA作为模板, n轮循环的产物中含有模板DNA链的DNA分子有     个、含有人工合成的DNA引物的DNA分子有    个。若DNA分子中共含900个碱基对,碱基数量满足:(A+T)(G+C)=12,经5次循环,至少需要向试管中加入     个腺嘌呤脱氧核苷酸(不考虑引物所对应的片段)

(3)PCR反应中所用到的酶是      ,其具有       的特性。

(4)普通番茄细胞导入目的基因后,先要接种到诱导培养基上培养,脱分化后得到           ,再转接到分化培养基上,诱导出试管苗,然后进一步培养成正常植株。

答案

1)多聚酶链式反应

22      2n    9300

3Taq     耐高温

4)愈伤组织

考查PCR技术、基因工程的原理、过程及应用。得到重组质粒要用到同一种的限制性内切酶处理目的基因和运载体,得到相同的粘性末端再用DNA连接酶将之连接起来构成基因表达载体PCR反应中所用到的酶是Taq 该酶具有耐高温的特性

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