微生物培养过程中，十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方

微生物培养过程中，十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（ ）

① 煮沸消毒可以杀死所有微生物，包括芽孢和孢子

② 接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③ 无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒

④ 家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

⑤ 培养基要进行高压蒸汽灭菌

⑥ 植物组织培养、动物细胞培养、无土栽培都需要在无菌无毒环境中进行

A ． ①③④ B ． ②④⑥ C ． ①③⑤ D ． ①④⑥

D

【分析】

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程．常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

① 煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢， ① 错误；

② 酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行， ② 正确；

③ 无菌繁殖脱毒苗，植物的外植体要进行消毒， ③ 正确；

④ 利用葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌， ④ 错误；

⑤ 培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌， ⑤ 正确；

⑥ 动物细胞培养与植物组织培养过程中均需要灭菌处理，需要在无菌无毒环境中进行，无土栽培的培养基应含有各种必需矿质元素，但不需要灭菌， ⑥ 错误。

综上错误的选项有 ①④⑥ ， D 正确。

故选 D 。